在《魔理沙与6个蘑菇》的游戏操作中，玩家可以灵活掌握各种技能来应对不同场景。首先，通过按键←，角色会向左移动，而→键则用于向右移动。在游戏中，当需要短暂的冲刺时，可以按下Z+X+→或Z+X←键，实现最大程度的左右方向跳跃。蹲下和向上爬动分别通过↓和↑来实现。

角色的跳跃功能非常丰富，除了基础的Z键，还可以利用组合键Z+X+→或Z+X←进行特殊跳跃。在水中，按下Z+↑可以帮助角色上岸。游戏的菜单功能通过A键开启，道具切换则由C键负责。

六个蘑菇道具各有特色：蘑菇让魔理沙变大，这被称为紫妈，具有强大的碰撞能力，能撞死敌人和破坏砖块，不过变身持续15秒。茶杯道具则让角色变成灵梦版，按X键发射阴阳玉；胡萝卜让角色变身兔子，短暂飞行可通过Z+X实现；帽子道具让玩家化身为泄矢诹访子，适合水中战斗；而桃子道具则带来天子版魔理沙，按X键可形成石头垫脚，助跳跃和砸击敌人。

长腿蘑菇是特殊道具，食用后魔理沙会变成无敌的种油库里，可以无时间限制存在，但无法切换其他角色，且除了火焰伤害外，几乎无敌。最后，UFO道具则会无时无刻地发射攻击箭矢，但在空中飞行的控制上稍有难度。

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